儲(chu)液(ye)器(qi)中的(de)流(liu)動相被(bei)高(gao)壓(ya)泵打入系統，樣品(pin)溶液(ye)經(jing)進樣器(qi)進入流(liu)動相，被(bei)流(liu)動相載(zai)入色(se)譜(pu)柱(zhu)(固定相)內，由(you)於(yu)樣(yang)品(pin)溶液(ye)中的(de)各(ge)組(zu)分(fen)在(zai)兩(liang)相中具(ju)有(you)不(bu)同的(de)分配(pei)系數(shu)，在兩(liang)相中作相(xiang)對(dui)運動時，經(jing)過反復多(duo)次(ci)的(de)吸(xi)附(fu)-解(jie)吸(xi)的(de)分(fen)配(pei)過程，各(ge)組(zu)分(fen)在(zai)移動速(su)度(du)上(shang)產(chan)生較(jiao)大(da)的(de)差(cha)別，被(bei)分離成單(dan)個(ge)組分(fen)依次(ci)從(cong)柱(zhu)內流(liu)出，通過(guo)檢(jian)測(ce)器(qi)時，樣品(pin)濃(nong)度(du)被(bei)轉(zhuan)換成電(dian)信(xin)號傳(chuan)送到(dao)記(ji)錄(lu)儀(yi)，數據(ju)以圖(tu)譜(pu)形式(shi)打印出來(lai)。

　　沃特世(shi)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)檢測(ce)儀(yi)的流(liu)動相脫(tuo)氣(qi)對(dui)於(yu)避(bi)免(mian)液相(xiang)色(se)譜(pu)系統出問題(ti)，順(shun)利得(de)到(dao)壹個(ge)理想(xiang)的數(shu)據是壹個(ge)很有(you)效(xiao)的措施(shi)。HPLC系統內是不(bu)希望有(you)氣(qi)泡存(cun)在(zai)的(de)。HPLC泵(beng)在(zai)輸送液體時要產(chan)生很(hen)大的(de)力(li)量，由(you)於(yu)氣(qi)體的(de)壓(ya)縮比(bi)與液體相(xiang)比(bi)大(da)的(de)多(duo)，因(yin)而(er)當(dang)氣(qi)泡存(cun)在(zai)時，妳將(jiang)觀察到(dao)瞬(shun)間(jian)的(de)流(liu)速(su)降低(di)和(he)系統壓力(li)下(xia)降。如(ru)果(guo)這個(ge)氣(qi)泡足(zu)夠大(da)，液相(xiang)泵將(jiang)不(bu)能輸(shu)送任何溶(rong)劑(ji)，而(er)且(qie)如果壓力(li)低(di)於(yu)預先設定的壓力(li)低(di)限，泵將(jiang)停(ting)止工作。有(you)些泵設計可以很好地排除(chu)氣(qi)泡，而(er)也(ye)有(you)壹些泵設計當氣(qi)泡存(cun)在(zai)時將(jiang)停(ting)止運轉。

　　當壹個(ge)氣(qi)泡通(tong)過輸液(ye)泵(beng)時，由(you)於(yu)系統壓力(li)大，氣(qi)泡通(tong)常(chang)會(hui)溶解在流(liu)動相溶(rong)液(ye)中，隨(sui)流(liu)動相通(tong)過(guo)柱(zhu)子。但是到(dao)達(da)檢(jian)測(ce)器(qi)流(liu)通池時系統壓力(li)又(you)恢(hui)復到(dao)了(le)大(da)氣(qi)壓，因(yin)而(er)氣(qi)泡可能(neng)在(zai)檢測(ce)器(qi)流(liu)通池中又(you)顯現，在(zai)色(se)譜(pu)圖(tu)上(shang)會出(chu)現(xian)不(bu)規(gui)律的毛刺。為解(jie)決(jue)這個(ge)問題(ti)，有(you)些儀(yi)器(qi)公(gong)司設計壹個(ge)反壓控(kong)制器(qi)，這樣(yang)可以在檢測(ce)器(qi)出口(kou)提(ti)供(gong)足(zu)夠的(de)壓力(li)保持氣(qi)泡始(shi)終溶解(jie)在(zai)流(liu)動相中直(zhi)到(dao)它(ta)們(men)流(liu)出檢測(ce)器(qi)。當然，這個(ge)壓力(li)不(bu)能超(chao)過流(liu)通池所(suo)能(neng)承受的(de)壓(ya)力(li)極限，否則可能(neng)損(sun)壞(huai)檢測(ce)器(qi)。

　　如果(guo)適(shi)當(dang)地關(guan)註(zhu)在(zai)沃(wo)特世(shi)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)檢測(ce)儀(yi)使用之前(qian)脫(tuo)去(qu)流(liu)動相中溶(rong)解進的空(kong)氣(qi)，上(shang)述這些問題(ti)均(jun)能(neng)避(bi)免(mian)，或(huo)把影響降至(zhi)zui低(di)。常(chang)用的脫(tuo)氣(qi)方(fang)法有(you)如下(xia)幾(ji)種(zhong)：

　　1、吹氦(hai)脫(tuo)氣(qi)法。利(li)用氦氣(qi)在液(ye)體中溶(rong)解度(du)比(bi)空(kong)氣(qi)低(di)的特性(xing)，在(zai)0.1MPa壓(ya)力(li)下(xia)，以約60mL/min流(liu)速(su)通(tong)入流(liu)動相儲(chu)液(ye)容(rong)器(qi)中10～15min，可以很有(you)效(xiao)地從(cong)流(liu)動相中排除(chu)溶解的(de)空(kong)氣(qi)，能排除(chu)接近80%的(de)氧(yang)氣(qi)。采用壹個(ge)分布(bu)式噴(pen)射(she)流(liu)裝置(zhi)，壹體積(ji)的(de)氦氣(qi)可從(cong)流(liu)動相中將(jiang)等(deng)體積(ji)的(de)幾(ji)乎全(quan)部(bu)氣(qi)體排除(chu)。這意(yi)味(wei)著(zhe)1L氦(hai)氣(qi)通過(guo)1L流(liu)動相就(jiu)可完(wan)成(cheng)排氣(qi)這個(ge)工作。這種(zhong)脫(tuo)氣(qi)方(fang)法雖(sui)然好(hao)，但我(wo)們國內氦氣(qi)價格(ge)較(jiao)高(gao)，很(hen)少有(you)實驗室(shi)采(cai)用此方(fang)法。

　　2、加(jia)熱回流(liu)法。此法的(de)脫(tuo)氣(qi)效(xiao)果較(jiao)好(hao)。在(zai)操作時要註(zhu)意冷(leng)凝(ning)塔(ta)的(de)冷卻效(xiao)率(lv)，否則溶(rong)劑(ji)會(hui)丟(diu)失，混(hun)合流(liu)動相的(de)比(bi)例(li)會有(you)變化。

　　3、抽(chou)真空(kong)脫(tuo)氣(qi)法。此法可使(shi)用真空(kong)泵(beng)，降壓(ya)至(zhi)0.05～0.07MPa即可除(chu)去(qu)溶解(jie)的氣(qi)體。但是由(you)於(yu)真空(kong)脫(tuo)氣(qi)會使(shi)混(hun)合溶(rong)劑(ji)組(zu)成(cheng)發生(sheng)變化，從(cong)而(er)影響到(dao)實(shi)驗的重(zhong)現性(xing)，因(yin)此多(duo)用於(yu)單(dan)溶(rong)劑(ji)體系的(de)簡(jian)單(dan)分(fen)析。

　　4、在線脫(tuo)氣(qi)法。現(xian)在商(shang)品(pin)的HPLC儀(yi)器(qi)，均(jun)可配(pei)在(zai)線脫(tuo)氣(qi)機。在(zai)線脫(tuo)氣(qi)使用簡(jian)單(dan)，低(di)故(gu)障(zhang)，有(you)效(xiao)。

　　5、超聲波(bo)脫(tuo)氣(qi)法。將(jiang)欲(yu)脫(tuo)氣(qi)的流(liu)動相置(zhi)於(yu)超(chao)聲波(bo)清(qing)洗(xi)器(qi)中，用超聲波(bo)震(zhen)蕩(dang)10～20min。此法的(de)脫(tuo)氣(qi)效(xiao)果zui差。

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