詳(xiang)細解說Agilent 1260液相色譜(pu)儀(yi)操(cao)作流(liu)程(cheng)及(ji)註意(yi)事(shi)項(xiang)

　　1、配制(zhi)流(liu)動(dong)相，水相(xiang)置於棕(zong)色玻(bo)璃(li)瓶中(zhong)，有(you)機(ji)相置於相(xiang)應(ying)無(wu)色玻(bo)璃(li)瓶中(zhong)。水相(xiang)和有機(ji)相必(bi)須(xu)過(guo)濾(lv)，濾(lv)膜(mo)選(xuan)用0.45有機(ji)系濾(lv)膜(mo)(尼龍)。註(zhu)意(yi)：過(guo)夜的流(liu)動(dong)相必須(xu)重新過濾(lv)。

　　2、流(liu)動(dong)相過濾(lv)後(hou)，置超(chao)聲(sheng)儀(yi)中(zhong)超(chao)聲(sheng)20min。

　　3、將(jiang)已超聲(sheng)的流(liu)動(dong)相輕輕換上(shang)，動(dong)作不要(yao)太(tai)劇烈，會產生(sheng)氣泡(pao)，註意(yi)不要(yao)把(ba)有機(ji)相和水相(xiang)換反了(le)(A是有機(ji)相，B是(shi)水相(xiang))。

　　4、將(jiang)色譜(pu)柱接(jie)上，註(zhu)意(yi)：流(liu)動(dong)相的流(liu)動(dong)方向(xiang)必須(xu)和色譜(pu)柱上(shang)的箭(jian)頭(tou)方向(xiang)壹致(zhi)。

　　5、打開計(ji)算(suan)機(ji)電源(yuan)、顯(xian)示(shi)器開關(guan)，並輸(shu)入(ru)密(mi)碼(ma)。

　　6、依次(ci)從上(shang)往(wang)下(xia)打開液相色譜(pu)儀(yi)上的(de)所(suo)有(you)開(kai)關(guan)。

　　7、打開液相色譜(pu)在(zai)線工作站(online)，輸(shu)入(ru)密(mi)碼(ma)。

　　8、打開的液相工作站上(shang)分(fen)為(wei)四(si)個(ge)小部分，依次(ci)為(wei)進(jin)樣(yang)器、泵(beng)、柱溫箱及(ji)檢測(ce)器(qi)。在(zai)第(di)二(er)個(ge)部分設(she)置流(liu)動(dong)相的體積(ji)及(ji)溶劑(ji)瓶的(de)總(zong)體積(ji)。

　　9、脫(tuo)氣：旋(xuan)開purge閥(fa)開關(guan)，右(you)擊(ji)泵部分，選(xuan)擇“method”，選(xuan)擇B相(xiang)100%，流(liu)速(su)1ml/min，選(xuan)擇確(que)定(ding);右(you)擊(ji)泵部分，選(xuan)擇“control”，選(xuan)擇pump “on”，10秒(miao)後(hou)，調(tiao)節流(liu)速(su)為(wei)3ml/min，10秒(miao)後(hou)，調(tiao)節流(liu)速(su)5ml/min，開始水相(xiang)脫(tuo)氣3min，水相(xiang)脫(tuo)氣結(jie)束後(hou)，將(jiang)流(liu)速(su)按照5ml/min-3ml/min-1ml/min的(de)流(liu)程(cheng)往(wang)下(xia)調(tiao)。然後(hou)開(kai)始有機(ji)相脫(tuo)氣，步驟(zhou)同上(shang)，註(zhu)意(yi)流(liu)速(su)不可壹(yi)下子(zi)從1ml/min調(tiao)到5ml/min，需慢慢調節(jie)。流(liu)動(dong)相脫(tuo)氣結(jie)束後(hou)，旋(xuan)緊purge閥(fa)開關(guan)。

　　10、建(jian)立樣(yang)品的(de)色譜(pu)方法：設(she)置進(jin)樣(yang)體積(ji)，選(xuan)擇洗(xi)針(zhen)進(jin)樣(yang)，註明洗(xi)針(zhen)位置;設(she)置流(liu)動(dong)相比例(li)、流(liu)速(su)及(ji)梯度洗(xi)脫(tuo)條(tiao)件，序(xu)列(lie)進樣(yang)時設(she)置樣(yang)品運行(xing)時間(jian)和後(hou)運行(xing)時間(jian);打開柱溫箱，設(she)置柱溫;打開紫外(wai)檢(jian)測(ce)燈(deng)，設置檢(jian)測(ce)波(bo)長(chang)。全部設置好(hao)後(hou)，保(bao)存(cun)方法，不要(yao)覆(fu)蓋別人(ren)的方法。

　　11、譜(pu)圖(tu)保(bao)存(cun)路徑(jing)的設(she)置：View—preferences—data path(第(di)二(er)個(ge)選(xuan)項(xiang))—remove舊(jiu)的(de)文(wen)件夾(jia)，add自(zi)己(ji)的文(wen)件夾(jia)。再打開Sequence—Sequence parameter—選(xuan)擇Data path為(wei)自(zi)己(ji)的文(wen)件夾(jia)即(ji)可。

　　12、設(she)置進(jin)樣(yang)序(xu)列(lie)，註意(yi)序(xu)列(lie)表的填(tian)寫(xie)。序(xu)列(lie)進樣(yang)後(hou)，如(ru)想關(guan)閉(bi)泵及(ji)檢測(ce)器(qi)，請(qing)點(dian)擊(ji)Sequence—Sequence parameter選(xuan)擇shutdown—standby。

　　13、將(jiang)樣(yang)品按順序(xu)擺(bai)放在(zai)自動(dong)進樣(yang)器的(de)托盤(pan)上。

　　14、註意(yi)泵(beng)壓力是(shi)否(fou)正常，色譜(pu)柱是(shi)否(fou)漏(lou)液，如壹切(qie)正常，關(guan)上(shang)柱溫箱的(de)蓋子。待(dai)基線平穩後(hou)，點(dian)擊(ji)Sequence進樣(yang)。

　　15、進樣(yang)結(jie)束後(hou)，需沖洗(xi)色譜(pu)柱，色譜(pu)柱很(hen)脆(cui)弱(ruo)，需用心(xin)保(bao)護(hu)。

　　16、液相用完後(hou)，請(qing)關(guan)閉(bi)液相色譜(pu)在(zai)線工作站，依次(ci)關(guan)閉(bi)液相色譜(pu)儀(yi)上的(de)開關(guan)，zui後(hou)關(guan)閉(bi)計(ji)算(suan)機(ji)。

　　17、將(jiang)自己(ji)的色譜(pu)柱換下(xia)時(shi)，需用連接管(guan)代(dai)替(ti)色譜(pu)柱連在液相上，不可以(yi)讓(rang)其暴(bao)露(lu)在空(kong)氣中(zhong)。

　　18、從(cong)計(ji)算(suan)機(ji)中(zhong)拷取譜(pu)圖(tu)必須(xu)使(shi)用CD/DVD盤刻(ke)錄，不可直(zhi)接(jie)使用U盤。

　　19、請(qing)大家(jia)共同(tong)維護(hu)液相色譜(pu)儀(yi)，每次(ci)做完(wan)液相，請(qing)收拾(shi)液相臺面，註(zhu)意(yi)臺面的(de)整潔(jie)，並註意(yi)廢(fei)液瓶，及(ji)時倒出廢液。