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壹(yi)、基線(xian)噪聲(sheng)
流(liu)動(dong)相(xiang)或檢測(ce)器(qi)中有氣(qi)泡時,要(yao)對流(liu)動(dong)相(xiang)進(jin)行脫(tuo)氣(qi)處(chu)理(li);檢(jian)測(ce)器(qi)燈有連(lian)續噪聲(sheng)時,更換氘燈;出現(xian)由(you)汙(wu)染引(yin)起的(de)隨機噪聲(sheng)時,應清洗(xi)色(se)譜柱、凈化(hua)樣品、使(shi)用(yong)HIPLC級(ji)試劑(ji);偶然(ran)有噪聲(sheng)時,可能是來(lai)自電源的幹(gan)擾(rao),如果電壓不(bu)穩時,應采用(yong)穩(wen)壓電源。
二、峰拖尾(wei)
色(se)譜柱超載時,要(yao)減(jian)少(shao)進(jin)樣量或稀釋樣品或使用(yong)高溶(rong)量(liang)的色(se)譜柱;色(se)譜柱性能不(bu)佳時,更換色(se)譜柱;死體(ti)積(ji)或柱外(wai)體(ti)積(ji)過(guo)大時,將連接(jie)降(jiang)至zui低(di),並(bing)對所(suo)有連(lian)接點作合理(li)的(de)調整(zheng),盡(jin)可能采用(yong)細(xi)內徑(jing)的(de)連(lian)接(jie);加(jia)入矽羥(qiang)基,其(qi)作用(yong)是(shi)純化(hua)色(se)譜柱,增(zeng)加(jia)緩(huan)沖(chong)液(ye)的濃(nong)度,降(jiang)低(di)流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)pH值(zhi),純(chun)化(hua)樣品;出現(xian)峰幹(gan)擾(rao)時,應清潔(jie)樣品,調整(zheng)流(liu)動(dong)相(xiang)。
三、峰展(zhan)寬(kuan)
進(jin)樣體積(ji)過(guo)大時,用(yong)流(liu)動(dong)相(xiang)配樣;樣品過(guo)載時,進(jin)小(xiao)濃度、小(xiao)體積(ji)樣品;在(zai)進(jin)樣閥中造成(cheng)峰擴(kuo)展(zhan)時,進(jin)樣前後排出氣(qi)泡,以降(jiang)低(di)擴(kuo)散(san);流(liu)動(dong)相(xiang)粘(zhan)度過(guo)高時,提高柱(zhu)溫(wen),並采用(yong)低(di)粘度流(liu)動(dong)相(xiang);等度洗(xi)脫(tuo),保(bao)留(liu)時間過長時,要(yao)增(zeng)加(jia)流(liu)速(su)或改用(yong)梯度洗(xi)脫(tuo);柱(zhu)外(wai)體(ti)積(ji)過(guo)大時,將連接(jie)管(guan)徑和(he)連結管(guan)降(jiang)至zui小(xiao)。
四、保(bao)留(liu)時間變(bian)化(hua)
保留(liu)時間的變(bian)化(hua)有三中情況(kuang):波(bo)動(dong)、縮短、延長。
保留(liu)時間出現(xian)波(bo)動(dong)時,應檢查(zha)柱(zhu)溫是(shi)否(fou)處於(yu)恒(heng)溫(wen)狀態,如果設(she)置(zhi)為(wei)室(shi)溫,氣(qi)溫(wen)的變(bian)化(hua)會引(yin)起(qi)保(bao)留(liu)時間的波(bo)動(dong),應該設置(zhi)為(wei)恒定(ding)溫(wen)度;等度和(he)梯度間還(hai)沒有充(chong)分達(da)到(dao)平(ping)衡(heng)狀(zhuang)態時,應該用(yong)十(shi)倍以(yi)上(shang)柱(zhu)體(ti)積(ji)的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)去平(ping)衡(heng)色(se)譜柱;緩沖液(ye)濃度太(tai)低(di)時,應換用(yong)>25mmol/L的(de)緩沖(chong)液(ye);色(se)譜柱被(bei)汙(wu)染或已經接近柱(zhu)壽(shou)命(ming)時,應更換保護(hu)柱或換新(xin)色(se)譜柱。
保留(liu)時間縮短時,流(liu)速(su)增(zeng)加(jia),應檢查(zha)流(liu)速(su)的設定(ding);柱溫高時,應檢查(zha)柱(zhu)的設(she)置(zhi);進(jin)樣量太(tai)大時,減(jian)少(shao)樣品用(yong)量(liang)或降(jiang)低(di)樣品濃(nong)度;流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)組成(cheng)發生了改變(bian),比(bi)如流(liu)動(dong)相(xiang)中易揮(hui)發有機(ji)相(xiang)蒸(zheng)發,兩相(xiang)之(zhi)間互溶不(bu)好,會導(dao)致(zhi)流(liu)動(dong)相(xiang)不(bu)均勻或某(mou)壹相(xiang)出現(xian)部(bu)分沈(chen)澱(dian);流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)PH值(zhi)應保持(chi)3~7.5範圍(wei)內(nei),否(fou)則(ze)會引(yin)起(qi)柱(zhu)鍵合(he)相(xiang)的(de)流(liu)失(shi)。
保留(liu)時間延長時,流(liu)速(su)減(jian)小(xiao),應檢查(zha)流(liu)速(su)的設定(ding)和管(guan)路(lu)是否(fou)有泄露;柱(zhu)溫(wen)低(di)時,檢查(zha)柱(zhu)溫的(de)設(she)置(zhi);流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)組成(cheng)發生了改變(bian),比(bi)如流(liu)動(dong)相(xiang)中易揮(hui)發有機(ji)相(xiang)蒸(zheng)發,兩相(xiang)之(zhi)間互溶不(bu)好,會導(dao)致(zhi)流(liu)動(dong)相(xiang)不(bu)均勻或某(mou)壹相(xiang)出現(xian)部(bu)分沈(chen)澱(dian);檢(jian)查(zha)流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)pH值(zhi)是(shi)否(fou)3~7.5範圍(wei)內(nei),否(fou)則(ze)會引(yin)起(qi)柱(zhu)鍵合(he)相(xiang)的(de)流(liu)失(shi)。


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