液(ye)相色(se)譜(pu)儀(yi)應用(yong)過(guo)程(cheng)中(zhong)常見問(wen)題分(fen)析

  液(ye)相色(se)譜(pu)儀(yi)主(zhu)要由貯液(ye)瓶(ping)、泵(beng)、進樣(yang)器(qi)、柱子、柱溫(wen)箱、檢(jian)測(ce)器、數據(ju)處(chu)理(li)系(xi)統組成(cheng)。對於(yu)整(zheng)個系(xi)統而言，柱子、泵(beng)和檢(jian)測(ce)器是(shi)核心(xin)。

液(ye)相色(se)譜(pu)儀(yi)作(zuo)為(wei)壹種(zhong)高(gao)精(jing)密(mi)儀(yi)器，如果在(zai)使用(yong)過(guo)程(cheng)中(zhong)不(bu)按(an)照(zhao)正確(que)操作(zuo)的話(hua)，就容易(yi)導(dao)致(zhi)壹些(xie)問(wen)題。其(qi)中(zhong)常見的就是(shi)柱壓(ya)問(wen)題、漂(piao)移問(wen)題、峰型異(yi)常問(wen)題。
　 1.柱壓(ya)問(wen)題：柱壓(ya)問(wen)題是(shi)使用(yong)液(ye)相色(se)譜(pu)儀(yi)過(guo)程(cheng)中(zhong)需要密切註(zhu)意的地(di)方(fang)，柱壓(ya)的(de)穩定與(yu)色(se)譜(pu)圖(tu)峰形的(de)好壞(huai)、柱效、分離(li)效果及保留時間等密切相關。所謂(wei)柱壓(ya)穩定並(bing)不(bu)是(shi)指壓(ya)力(li)值(zhi)穩定於(yu)壹個恒(heng)定值(zhi)而(er)是(shi)指壓(ya)力(li)波(bo)動(dong)範圍(wei)在(zai)50PSI(3.3Bar)之間(jian)(在(zai)使用(yong)梯度(du)洗(xi)脫(tuo)時，柱壓(ya)平(ping)穩緩慢(man)的變(bian)化是(shi)允許(xu)的)。壓(ya)力(li)過(guo)高(gao)、過(guo)低都(dou)屬於柱壓(ya)問(wen)題。
2.壓(ya)力(li)過(guo)高(gao)：這是(shi)液(ye)相色(se)譜(pu)儀(yi)在(zai)使用(yong)中(zhong)常見的問(wen)題，指(zhi)的(de)是(shi)壓(ya)力(li)突(tu)然升高，壹般(ban)都(dou)是(shi)由於流路(lu)中(zhong)有(you)堵(du)塞的原因。此時(shi)，我(wo)們應該分段(duan)進行檢(jian)查。
　 (1).首先(xian)斷(duan)開(kai)真空(kong)泵(beng)的(de)入(ru)口處，此時(shi)PEEK管(guan)裏充(chong)滿(man)液(ye)體，使PEEK管(guan)低於(yu)溶劑瓶(ping)，看(kan)液(ye)體是(shi)否自由滴下，如果液(ye)體不(bu)滴(di)或(huo)緩慢(man)滴(di)下(xia)，則是(shi)溶劑過(guo)濾(lv)頭(tou)堵(du)塞。處理(li)方(fang)法：用(yong)30%的(de)硝(xiao)酸浸泡(pao)半(ban)個小時，在(zai)用(yong)超(chao)純水沖(chong)洗(xi)幹凈。如果液(ye)體自由滴下，溶劑過(guo)濾(lv)頭(tou)正常，在(zai)檢(jian)查;
　 (2).打(da)開Purge閥，使流動相不(bu)經(jing)過(guo)柱子，如果壓(ya)力(li)沒(mei)有(you)明顯下(xia)降(jiang)，則是(shi)過(guo)濾(lv)白(bai)頭堵(du)塞。處理(li)方(fang)法：將(jiang)過(guo)濾(lv)白(bai)頭取出(chu)，用(yong)10%的(de)異(yi)丙(bing)醇超(chao)聲半(ban)個小時。如果壓(ya)力(li)降(jiang)至(zhi)100PSI(6.7Bar)以下，過(guo)濾(lv)白(bai)頭正常，在(zai)檢(jian)查;
(3).把色(se)譜(pu)柱出(chu)口(kou)端(duan)取下(xia)，如果壓(ya)力(li)不(bu)下(xia)降(jiang)，則(ze)是(shi)柱子堵(du)塞。處理(li)方(fang)法：如果是(shi)緩沖(chong)鹽(yan)堵(du)塞，則用(yong)95%的(de)水(shui)沖(chong)至(zhi)壓(ya)力(li)正(zheng)常。如果是(shi)壹些(xie)強(qiang)保留的物質(zhi)導(dao)致(zhi)堵(du)塞，則要用(yong)比(bi)現(xian)在(zai)流動相更(geng)強的(de)流動相沖(chong)至(zhi)壓(ya)力(li)正(zheng)常。假如按(an)上(shang)面(mian)的方(fang)法長(chang)時間(jian)沖洗(xi)壓(ya)力(li)都(dou)不(bu)下(xia)降(jiang)，則(ze)可(ke)考慮(lv)將柱子的進出(chu)口(kou)反過(guo)來接(jie)在(zai)儀器上，用(yong)流動相沖(chong)洗(xi)柱子。這時，如果柱壓(ya)仍(reng)不(bu)下(xia)降(jiang)，只(zhi)有(you)換(huan)柱子入口篩板(ban)，但(dan)壹旦(dan)操作(zuo)不(bu)甚(shen)，很(hen)容易(yi)造成柱效下降，所以(yi)盡(jin)量(liang)少(shao)用(yong)。
　　3.壓(ya)力(li)過(guo)低：壓(ya)力(li)過(guo)低的(de)現(xian)象壹般(ban)是(shi)由於系(xi)統泄(xie)漏(lou)，處(chu)理(li)方(fang)法：尋(xun)找各(ge)個接(jie)口處，特(te)別(bie)是(shi)色(se)譜(pu)柱兩端(duan)的接(jie)口，把泄(xie)漏(lou)的(de)地(di)方(fang)旋(xuan)緊即(ji)可(ke)。當(dang)然還(hai)有(you)壹個原因就是(shi)泵(beng)裏進了空(kong)氣，但(dan)此時(shi)表(biao)現的(de)往往是(shi)壓(ya)力(li)不(bu)穩，忽(hu)高(gao)忽(hu)低，更(geng)嚴重(zhong)壹點(dian)會(hui)導(dao)致(zhi)泵(beng)無(wu)法(fa)吸上液(ye)體。處理(li)方(fang)法：打(da)開Purge閥，用(yong)3~5ml/min的(de)流速(su)沖洗(xi)，如果不(bu)行(xing)，則(ze)要用(yong)針(zhen)筒在(zai)排空(kong)閥處(chu)借住外(wai)力(li)將(jiang)氣(qi)泡(pao)吸出(chu)。