安(an)捷倫(lun)LC-MSMS液相色(se)譜--質(zhi)譜聯用儀(yi)--維(wei)護指(zhi)南(nan)

液相色(se)譜 - 質(zhi)譜聯用儀(yi)（LC-MS/MS）維(wei)護指(zhi)導

壹(yi)、日(ri)常維(wei)護（每(mei)日(ri) / 每(mei)次(ci)實驗(yan)前後(hou)）

（壹(yi)）液相色(se)譜（LC）部(bu)分

1. 流(liu)動(dong)相與(yu)溶(rong)劑管理(li)

• 流(liu)動(dong)相需使(shi)用 色(se)譜純(chun)試劑，水需為(wei)超純水(shui)（電阻(zu)率≥18.2 MΩ・cm），避(bi)免(mian)雜質(zhi)汙染色(se)譜柱(zhu)與(yu)離子源(yuan)。

• 流動(dong)相配(pei)制後(hou)需 超聲脫(tuo)氣 10-15 min（或使(shi)用在線脫氣機），防止氣泡進入(ru)泵(beng)體導致壓(ya)力(li)波動(dong)、峰(feng)形(xing)異(yi)常。

• 含緩(huan)沖(chong)鹽（如(ru) ammonium acetate、formic acid-ammonium formate 等(deng)）的流動(dong)相需 現配(pei)現用，避(bi)免(mian)微生物(wu)滋生（緩(huan)沖(chong)鹽(yan)溶(rong)液放(fang)置不(bu)超過 48 h）；實(shi)驗(yan)結束後(hou)需用無(wu)鹽流動(dong)相（如(ru)甲(jia)醇(chun) - 水、乙(yi)腈 - 水(shui)）沖洗管路與(yu)色(se)譜柱(zhu)，防止鹽結晶堵塞。

• 溶(rong)劑瓶需定(ding)期清洗（每(mei)周(zhou) 1 次），避(bi)免(mian)殘(can)留(liu)溶(rong)劑與(yu)雜質累積；瓶(ping)口密封(feng)墊若(ruo)出現老(lao)化、滲漏(lou)，需及時(shi)更(geng)換(huan)。

2. 泵(beng)系(xi)統(tong)檢(jian)查(zha)

• 開機前檢(jian)查(zha)溶(rong)劑瓶液位(wei)，確(que)保(bao)溶(rong)劑充(chong)足（不(bu)低於(yu)瓶身 1/3），避(bi)免(mian)泵(beng)空(kong)轉損壞(huai)密封(feng)圈。

• 觀(guan)察(cha)泵(beng)壓(ya)力(li)曲(qu)線：基(ji)線壓(ya)力(li)應(ying)穩(wen)定(ding)（波(bo)動(dong)≤±2%），若(ruo)壓(ya)力(li)驟升（可能是(shi)管路堵塞、色(se)譜柱(zhu)汙(wu)染）或驟降(jiang)（可能是(shi)漏液、溶(rong)劑耗盡(jin)），需立即(ji)停(ting)機排(pai)查。

• 實(shi)驗(yan)結束後(hou)，用 100% 甲(jia)醇(chun)或乙(yi)腈沖(chong)洗泵(beng)管路 15-30 min（流速(su) 0.2-0.5 mL/min），保(bao)護(hu)泵(beng)密(mi)封墊與(yu)單向閥(fa)。

3. 進樣器維(wei)護

• 每(mei)次(ci)實驗(yan)前，用流(liu)動(dong)相或樣品溶(rong)劑沖洗(xi)進樣針 3-5 次(ci)，避(bi)免(mian)樣品交叉(cha)汙(wu)染。

• 定(ding)期檢查(zha)進樣針是(shi)否(fou)有堵塞、彎(wan)曲(qu)，若(ruo)出現樣(yang)品殘(can)留(liu)嚴(yan)重（峰(feng)形(xing)拖(tuo)尾(wei)、重現(xian)性差），需用甲(jia)醇(chun) - 水（1:1）或專(zhuan)用清洗液超聲清洗進樣針（10 min）。

• 檢(jian)查進樣口密封(feng)墊（ septum ）：若(ruo)出現滲漏(lou)、磨(mo)損（進樣時阻(zu)力(li)增(zeng)大），需及時(shi)更(geng)換(huan)（壹(yi)般(ban)每(mei) 500-1000 次(ci)進樣更(geng)換(huan) 1 次）。

4. 色(se)譜柱(zhu)保(bao)護(hu)

• 色(se)譜柱(zhu)使(shi)用前需確(que)認流(liu)動(dong)相兼容性（避(bi)免(mian)使(shi)用與(yu)固定(ding)相反(fan)應(ying)的溶(rong)劑），並按(an)柱(zhu)說明(ming)書設(she)定(ding)柱(zhu)溫(wen)（±1℃ 穩(wen)定(ding)）。

• 樣(yang)品需經 0.22 μm 濾膜過濾（或離心(xin) 12000 rpm/10 min），去除顆(ke)粒物(wu)，防止堵塞色(se)譜柱(zhu)篩(shai)板(ban)。

• 實(shi)驗(yan)結束後(hou)，用梯度(du)洗(xi)脫(tuo)方式(shi)沖(chong)洗色(se)譜柱(zhu)：先(xian)以 10% 有機相沖(chong)洗(xi) 10 柱(zhu)體積（去(qu)除緩(huan)沖鹽(yan)），再(zai)用 90% 有機相沖(chong)洗(xi) 15 柱(zhu)體積（去(qu)除強(qiang)保(bao)留(liu)雜(za)質），最後以 50% 有機相平(ping)衡(heng)色(se)譜柱(zhu)，密(mi)封(feng)保(bao)存（反(fan)相柱(zhu)用甲(jia)醇(chun) / 乙(yi)腈，正(zheng)相柱(zhu)用正(zheng)己烷）。

（二(er)）質(zhi)譜(pu)（MS/MS）部(bu)分

1. 離(li)子(zi)源(yuan)清潔與(yu)檢查

• 噴(pen)針：用甲(jia)醇(chun)或異(yi)丙醇(chun)擦拭外壁，若(ruo)堵塞可將針尖(jian)浸入(ru)甲(jia)醇(chun) - 水（1:1）超聲 5 min（避(bi)免(mian)超聲時(shi)間過(guo)長損壞(huai)噴針）。

• 錐孔(kong) / 毛(mao)細管：用蘸(zhan)有甲(jia)醇(chun)的無塵紙輕(qing)輕(qing)擦拭，或用 5% 硝(xiao)酸(suan)溶(rong)液浸泡 10 min（去(qu)除金(jin)屬殘(can)留(liu)），再(zai)用超純水(shui)沖洗(xi)、烘(hong)幹(gan)（60℃ 烘(hong)箱(xiang) 30 min）。

• 每(mei)次(ci)實驗(yan)前，目(mu)視(shi)檢(jian)查(zha)離子(zi)源噴(pen)針、錐孔(kong)（或毛細(xi)管）是(shi)否(fou)有結晶、殘(can)留(liu)（表(biao)現(xian)為(wei)質(zhi)譜(pu)響(xiang)應(ying)降(jiang)低(di)、基(ji)線噪音增(zeng)大），若(ruo)有汙染需及時(shi)清潔。

• 清潔方法：

• 檢查(zha)離子(zi)源氣體（氮氣(qi) / 氬氣(qi)）壓(ya)力(li)：霧(wu)化氣、幹(gan)燥(zao)氣壓(ya)力(li)需符合(he)儀器要(yao)求(qiu)（壹(yi)般(ban)霧(wu)化氣 0.3-0.5 MPa，幹(gan)燥(zao)氣 0.2-0.4 MPa），氣體需經分(fen)子篩過(guo)濾（去除水(shui)分、油(you)霧(wu)）。

2. 質(zhi)量軸(zhou)校(xiao)準(zhun)

• 每(mei)次(ci)開機後(hou)，需進行質量軸(zhou)校(xiao)準(zhun)（使(shi)用儀(yi)器專(zhuan)用校(xiao)準(zhun)液，如(ru) Pierce LTQ Velos 校(xiao)準(zhun)液、Agilent ESI Tuning Mix），確(que)保(bao)質(zhi)荷比(bi)（m/z）準確(que)性（誤差≤±0.1 Da）。

• 若(ruo)實驗(yan)過程(cheng)中出現峰(feng)漂(piao)移(yi)、定(ding)性錯誤(wu)，需重新校(xiao)準(zhun)質量軸(zhou)。

3. 真(zhen)空(kong)系(xi)統(tong)檢(jian)查(zha)

• 開機後(hou)觀(guan)察(cha)真(zhen)空(kong)度：質譜真空(kong)系(xi)統(tong)（機械(xie)泵(beng) + 分(fen)子泵(beng)）需達(da)到設(she)定(ding)真(zhen)空(kong)值（壹(yi)般(ban)壹(yi)級真(zhen)空＜10⁻³ mbar，二(er)級真(zhen)空＜10⁻⁶ mbar），若(ruo)真空度(du)無(wu)法達(da)標（可能是(shi)密封(feng)圈老化、真空(kong)閥(fa)故障、分(fen)子(zi)泵(beng)損壞(huai)），需停機排(pai)查。

• 機械(xie)泵(beng)維(wei)護：檢(jian)查(zha)機械(xie)泵(beng)油(you)位(wei)（需在油(you)標上下(xia)限(xian)之間），若(ruo)油(you)色(se)變深(shen)、渾(hun)濁（壹(yi)般(ban)每(mei) 6-12 個(ge)月(yue)），需更(geng)換(huan)機械(xie)泵(beng)油(you)（使(shi)用儀(yi)器專(zhuan)用油(you)，如(ru) Edwards Ultragrade 19）；更(geng)換(huan)後需運(yun)行機械(xie)泵(beng) 30 min 排(pai)氣。

4. 檢測(ce)器保(bao)護(hu)

• 避(bi)免(mian)高濃(nong)度(du)樣品直接(jie)進樣（樣品濃(nong)度(du)需匹(pi)配(pei)儀器檢測(ce)範圍(wei)，壹(yi)般(ban) ng/mL-μg/mL 級別(bie)），防止檢測(ce)器飽(bao)和損壞(huai)。

• 實驗(yan)結束後(hou)，繼(ji)續通(tong)幹(gan)燥(zao)氣 15-30 min，吹幹(gan)離子(zi)源內部(bu)殘(can)留(liu)溶(rong)劑，避(bi)免(mian)水分(fen)凝結(jie)影(ying)響(xiang)真(zhen)空(kong)系(xi)統(tong)。

二(er)、定(ding)期保(bao)養（每(mei)周(zhou) / 每(mei)月(yue) / 每(mei)季(ji)度 / 每(mei)年）

（壹(yi)）每(mei)周(zhou)保(bao)養

1. 清洗溶(rong)劑瓶與(yu)進樣器樣品環：用甲(jia)醇(chun) - 水（1:1）超聲清洗溶(rong)劑瓶（10 min），進樣器樣品環用 100% 甲(jia)醇(chun)沖洗(xi) 20 min（流速(su) 0.5 mL/min）。

2. 檢(jian)查色(se)譜柱(zhu)性能：通(tong)過進樣標準品（如(ru)利血平(ping)），觀(guan)察(cha)保(bao)留(liu)時(shi)間 RSD（≤1%）、峰(feng)面積 RSD（≤3%）、理(li)論(lun)塔(ta)板(ban)數（需符合(he)柱(zhu)說明(ming)書要(yao)求(qiu)），若(ruo)性能下降需進行柱(zhu)再(zai)生（反(fan)相柱(zhu)：用甲(jia)醇(chun) - 乙(yi)腈 - 水(shui) = 50:40:10 沖洗 20 柱(zhu)體積）。

3. 清潔離子源(yuan)腔(qiang)體：拆除離(li)子源(yuan)組件(jian)，用甲(jia)醇(chun)擦拭腔(qiang)體內部(bu)，去除殘(can)留(liu)汙(wu)染物(wu)，晾(liang)幹(gan)後重新安(an)裝(zhuang)。

（二(er)）每(mei)月(yue)保(bao)養

1. 更(geng)換(huan)泵(beng)密(mi)封墊與(yu)單向閥(fa)：若(ruo)泵(beng)壓(ya)力(li)波動(dong)大、漏液，需更(geng)換(huan)泵(beng)頭密封墊(dian)（壹(yi)般(ban)每(mei) 3-6 個(ge)月(yue)）；單(dan)向閥(fa)若(ruo)出現堵(du)塞（表(biao)現(xian)為(wei)流(liu)速(su)不(bu)穩），用甲(jia)醇(chun)超聲清洗 10 min，或直接(jie)更(geng)換(huan)。

2. 檢查(zha)質(zhi)譜(pu)傳輸線：傳輸線若(ruo)有殘(can)留(liu)，用蘸(zhan)有甲(jia)醇(chun)的無塵紙擦(ca)拭，避(bi)免(mian)汙染物(wu)進入(ru)質(zhi)量(liang)分(fen)析(xi)器。

3. 校(xiao)準(zhun)流速(su)準(zhun)確(que)性：用容(rong)量瓶校(xiao)準(zhun)泵(beng)流(liu)速(su)（設(she)定(ding)流(liu)速(su) 1.0 mL/min，收(shou)集 10 min 流(liu)出(chu)液，稱重計(ji)算(suan)實際(ji)流速(su)，誤(wu)差≤±2%）。

4. 更(geng)換(huan)氮氣(qi) / 氬氣(qi)鋼瓶(ping)：若(ruo)鋼瓶(ping)壓(ya)力(li)低於(yu) 0.5 MPa，及時(shi)更(geng)換(huan)，更(geng)換(huan)後 purge 管路 5 min，去除空(kong)氣。

（三）每(mei)季(ji)度保(bao)養

1. 更(geng)換(huan)色(se)譜柱(zhu)篩(shai)板(ban)：若(ruo)色(se)譜柱(zhu)壓(ya)力(li)持續升高(gao)，且(qie)沖洗後無改(gai)善，可能是(shi)篩板(ban)堵(du)塞，需更(geng)換(huan)色(se)譜柱(zhu)入(ru)口篩板(ban)（按(an)柱(zhu)型(xing)號(hao)匹(pi)配(pei)）。

2. 清潔質量分(fen)析(xi)器：對於(yu)三重四(si)極桿質譜(pu)，需清潔四極桿電極（用甲(jia)醇(chun)擦拭，避(bi)免(mian)劃傷(shang)電(dian)極表(biao)面）；若(ruo)儀器配備(bei)碰撞池(chi)（如(ru) Q2），需檢查(zha)碰撞氣(qi)（氬氣(qi)）流量，確(que)保(bao)碰撞效(xiao)率穩(wen)定(ding)。

3. 檢(jian)查(zha)機械(xie)泵(beng)密(mi)封圈：若(ruo)機械(xie)泵(beng)出(chu)現漏油(you)、真(zhen)空(kong)度(du)下(xia)降，需更(geng)換(huan)密封(feng)圈（使(shi)用儀(yi)器專(zhuan)用配(pei)件(jian)）。

4. 驗(yan)證(zheng)儀器檢出(chu)限(xian)與(yu)精密度(du)：進樣低濃(nong)度(du)標準品（接近(jin)檢(jian)出限(xian)），計(ji)算檢(jian)出限(xian)（S/N≥3）與(yu)精密度(du)（峰(feng)面積 RSD≤5%），確(que)保(bao)儀(yi)器性能達(da)標。

（四）每(mei)年保(bao)養（建議(yi)由廠家工(gong)程師(shi)執行）

1. 更(geng)換(huan)分子(zi)泵(beng)：分(fen)子泵(beng)使(shi)用壽(shou)命壹(yi)般(ban)為(wei) 5000-8000 小(xiao)時(shi)，若(ruo)出現真(zhen)空(kong)度(du)下(xia)降、噪音增(zeng)大，需更(geng)換(huan)分子(zi)泵(beng)。

2. 全面清潔質譜腔(qiang)體：拆除質(zhi)量分(fen)析(xi)器、檢測(ce)器等核心(xin)部(bu)件(jian)，專(zhuan)業清潔內部(bu)殘(can)留(liu)汙(wu)染物(wu)（如(ru)離(li)子源逸散(san)的鹽類、有機物(wu)）。

3. 校(xiao)準(zhun)檢測(ce)器響(xiang)應(ying)：使(shi)用標準品校(xiao)準(zhun)檢測(ce)器靈(ling)敏度(du)，確(que)保(bao)線性範圍(wei)（壹(yi)般(ban) R²≥0.995）。

4. 檢查電(dian)路系(xi)統(tong)：排(pai)查(zha)儀(yi)器主板(ban)、電(dian)源、連(lian)接(jie)線是(shi)否(fou)有老化、松動(dong)，確(que)保(bao)電(dian)路安(an)全穩定(ding)。

三、關鍵部(bu)件(jian)維(wei)護要(yao)點

（壹(yi)）色(se)譜柱(zhu)

• 禁(jin)止使(shi)用pH 流(liu)動(dong)相（反(fan)相柱(zhu)壹(yi)般(ban) pH 2-8，正(zheng)相柱(zhu) pH 3-7），避(bi)免(mian)固定(ding)相水(shui)解(jie)。

• 避(bi)免(mian)驟冷(leng)驟熱(re)：柱(zhu)溫(wen)變化速(su)率(lv)≤5℃/min，防止色(se)譜柱(zhu)填料(liao)塌(ta)陷。

• 長期不用時(shi)，需密封(feng)保(bao)存於(yu)陰涼(liang)幹(gan)燥(zao)處(chu)，避(bi)免(mian)陽光(guang)直射(she)。

（二(er)）離(li)子(zi)源(yuan)

• 不同離子源（ESI、APCI、MALDI）維(wei)護差異(yi)：

• ESI 源：重點清潔噴針、毛(mao)細管，避(bi)免(mian)緩沖(chong)鹽結(jie)晶（建議(yi)流動(dong)相中緩沖鹽(yan)濃(nong)度(du)≤10 mM）。

• APCI 源：清潔加熱(re)毛細(xi)管與(yu) corona 放電針，防止有機物(wu)碳(tan)化殘(can)留(liu)。

• MALDI 源(yuan)：清潔樣品靶(ba)（用甲(jia)醇(chun)擦拭，或超聲清洗），避(bi)免(mian)樣品交叉(cha)汙(wu)染。

• 離子(zi)源(yuan)溫(wen)度(du)控(kong)制：幹(gan)燥(zao)氣溫(wen)度(du)需高於(yu)流動(dong)相沸點 10-20℃，防止溶(rong)劑冷(leng)凝（如(ru)甲(jia)醇(chun)流動(dong)相，幹(gan)燥(zao)氣溫(wen)度(du)≥50℃）。

（三）真(zhen)空系(xi)統(tong)

• 機械(xie)泵(beng)：避(bi)免(mian)頻繁(fan)啟(qi)停（每(mei)次(ci)停機後(hou)需間隔(ge) 30 min 再開機），防止泵(beng)油(you)乳化。

• 分子(zi)泵(beng)：運(yun)行時禁(jin)止觸碰，避(bi)免(mian)震動(dong)影(ying)響(xiang)真(zhen)空(kong)穩定(ding)性；若(ruo)遇突然(ran)停(ting)電(dian)，需關閉(bi)儀器電源(yuan)，待來電(dian)後(hou)按(an)程序重啟(qi)（先開機械(xie)泵(beng)，待真空(kong)達(da)標後再(zai)開分(fen)子泵(beng)）。

（四(si)）檢測(ce)器

• 避(bi)免(mian)長時(shi)間(jian)暴露在高(gao)濃(nong)度(du)離子流中（如(ru)連(lian)續進樣高濃(nong)度(du)標準品），防止檢測(ce)器疲勞。

• 若(ruo)檢測(ce)器響(xiang)應(ying)降(jiang)低(di)，可清潔檢測(ce)器窗口（用甲(jia)醇(chun)擦拭），或聯系(xi)廠家進行檢測(ce)器校(xiao)準(zhun)。

四、故障預(yu)防與(yu)註(zhu)意(yi)事(shi)項

1. 實驗(yan)室(shi)環境控制

2. 溫(wen)度(du)：20-25℃（波(bo)動(dong)≤±2℃），避(bi)免(mian)靠近(jin)熱源（如(ru)烘(hong)箱(xiang)、空(kong)調(tiao)出(chu)風(feng)口）。

3. 濕(shi)度(du)：40%-60%，濕(shi)度(du)過高易(yi)導致儀(yi)器內部(bu)結露(lu)、電(dian)路短(duan)路；濕(shi)度(du)過低易(yi)產生靜(jing)電，影(ying)響(xiang)質(zhi)譜(pu)信號(hao)。

4. 電源：使(shi)用穩(wen)壓(ya)電源(yuan)（電壓(ya) 220V±10%，頻率(lv) 50Hz±1Hz），避(bi)免(mian)電壓(ya)波動(dong)損壞(huai)儀器。

5. 
   

6. 操作(zuo)規範(fan)

7. 嚴格按(an)儀器操作(zuo)規程(cheng)開機 / 關機：開機順序（LC→MS 機械(xie)泵(beng)→MS 分(fen)子泵(beng)→真(zhen)空達(da)標→校(xiao)準(zhun)→實驗(yan)）；關機順序（停(ting)止進樣→沖洗(xi) LC 管路與(yu)色(se)譜柱(zhu)→關閉(bi) MS 離子(zi)源(yuan)→關閉(bi)分子(zi)泵(beng)→待真空(kong)釋(shi)放後關閉(bi)機械(xie)泵(beng)→關閉(bi) LC）。

8. 禁(jin)止在真(zhen)空(kong)未達(da)標時進樣，禁(jin)止用強(qiang)腐蝕(shi)性溶(rong)劑（如(ru)濃(nong)鹽(yan)酸(suan)、氫(qing)氧(yang)化鈉溶(rong)液）作(zuo)為(wei)流(liu)動(dong)相。

9. 樣(yang)品前處(chu)理(li)需規範(fan)：避(bi)免(mian)樣品中含有高濃(nong)度(du)鹽、強氧化性物(wu)質(zhi)（如(ru)過(guo)氧化氫(qing)），防止損壞(huai)離子(zi)源(yuan)與(yu)色(se)譜柱(zhu)。

10. 常見故障預(yu)警與(yu)處(chu)理(li)

    故障現(xian)象(xiang)	可能原因	預(yu)防措(cuo)施(shi)
    泵(beng)壓(ya)力(li)驟升	管路堵塞、色(se)譜柱(zhu)篩(shai)板(ban)堵(du)塞	樣(yang)品過濾、定(ding)期沖洗(xi)管路、更(geng)換(huan)色(se)譜柱(zhu)篩(shai)板(ban)
    質(zhi)譜(pu)響(xiang)應(ying)降(jiang)低(di)	離子(zi)源汙染、質量(liang)軸(zhou)漂(piao)移(yi)	每(mei)日(ri)清潔離子源(yuan)、定(ding)期校(xiao)準(zhun)質量軸(zhou)
    峰(feng)形(xing)拖(tuo)尾(wei) / 分(fen)裂(lie)	色(se)譜柱(zhu)汙(wu)染、進樣量過(guo)大	柱(zhu)再(zai)生、減少進樣量、優(you)化流動(dong)相 pH
    真(zhen)空(kong)度(du)不(bu)達(da)標	密封(feng)圈老化、機械(xie)泵(beng)油(you)汙(wu)染	定(ding)期更(geng)換(huan)密封(feng)圈與(yu)機械(xie)泵(beng)油(you)、檢(jian)查(zha)真(zhen)空(kong)閥(fa)
    定(ding)性錯誤(wu)	質(zhi)量(liang)軸(zhou)偏(pian)移(yi)、標準品失效(xiao)	每(mei)日(ri)校(xiao)準(zhun)質量軸(zhou)、使(shi)用新鮮標準品

五(wu)、維(wei)護記錄(lu)與(yu)臺賬(zhang)

1. 日(ri)常維(wei)護：日(ri)期、操作(zuo)人員(yuan)、流動(dong)相配(pei)制情(qing)況、離子(zi)源清潔情(qing)況、質量(liang)軸(zhou)校(xiao)準(zhun)結果(guo)。

2. 定(ding)期保(bao)養：周(zhou)期、保(bao)養項目（如(ru)更(geng)換(huan)密封(feng)墊(dian)、清潔質量分(fen)析(xi)器）、更(geng)換(huan)部(bu)件(jian)型(xing)號(hao)與(yu)數量。

3. 故障記錄(lu)：故障現(xian)象(xiang)、排查過(guo)程、解(jie)決(jue)方案、維(wei)修(xiu)人員(yuan)（廠家 / 內部(bu)）。

4. 儀器狀態(tai)：壓(ya)力(li)、真空(kong)度、標準品保(bao)留(liu)時(shi)間 / 峰(feng)面積、檢(jian)出(chu)限(xian)等(deng)關鍵參數。

總結