儲液器(qi)中的流動相被(bei)高(gao)壓泵(beng)打(da)入系(xi)統(tong)，樣(yang)品(pin)溶(rong)液經(jing)進(jin)樣(yang)器進(jin)入(ru)流動相，被(bei)流動相載入色(se)譜(pu)柱(固定相) 內(nei)，由(you)於樣(yang)品(pin)溶(rong)液中的各組分(fen)在(zai)兩(liang)相中具有不(bu)同的分(fen)配(pei)系數，在(zai)兩(liang)相中做(zuo)相對運動時，經(jing)過反復(fu)多(duo)次的吸附- 解(jie)吸的分(fen)配(pei)過程，各(ge)組(zu)分(fen)在(zai)移(yi)動速度上產(chan)生較大(da)的差別，被分(fen)離(li)成單個組分(fen)依(yi)次從柱內流出，通過檢測(ce)器(qi)時(shi)，樣(yang)品(pin)濃度被轉(zhuan)換成(cheng)電(dian)信號(hao)傳(chuan)送到(dao)記(ji)錄儀(yi)，數據(ju)以圖(tu)譜(pu)形式打(da)印出來。HPLC廣泛(fan)應(ying)用(yong)於生命科(ke)學(xue)、食(shi)品(pin)科學(xue)、藥物研(yan)究以(yi)及(ji)環(huan)境(jing)研(yan)究中。
 

　　高(gao)效液(ye)相色(se)譜(pu)是應(ying)用(yong)非常多(duo)的色(se)譜(pu)分(fen)析(xi)方法，高(gao)效液(ye)相色(se)譜(pu)系統(tong)由(you)流動相儲(chu)液體(ti)瓶(ping)、輸液(ye)泵(beng)、進(jin)樣(yang)器、色(se)譜(pu)柱、檢測(ce)器(qi)和(he)記(ji)錄器(qi)組(zu)成(cheng)，其整體(ti)組成類(lei)似於氣(qi)相色(se)譜(pu)，但是(shi)針對其流動相為(wei)液體(ti)的特(te)點作出很多調整。
 

　　HPLC的輸液(ye)泵(beng)要(yao)求輸液(ye)量恒(heng)定平(ping)穩;進(jin)樣(yang)系統(tong)要求(qiu)進(jin)樣(yang)便利(li)切換嚴密;由(you)於液(ye)體(ti)流動相粘(zhan)度遠(yuan)遠(yuan)高(gao)於氣(qi)體(ti)，為了減低(di)柱壓高(gao)效液(ye)相色(se)譜(pu)的色(se)譜(pu)柱壹(yi)般比(bi)較粗(cu)，長(chang)度也遠(yuan)小(xiao)於氣(qi)相色(se)譜(pu)柱。
 

　　HPLC應用非常廣泛(fan)，幾乎遍(bian)及(ji)定量定性分(fen)析(xi)的各個領域(yu)。
 

　　使用(yong)高(gao)效液(ye)相色(se)譜(pu)時，液(ye)體(ti)待(dai)檢測(ce)物(wu)被(bei)註(zhu)入色(se)譜(pu)柱，通過壓力在(zai)固定相中移動，由(you)於被(bei)測(ce)物(wu)種(zhong)不同物(wu)質與固定相的相互(hu)作用不(bu)同，不(bu)同的物質順序(xu)離(li)開色(se)譜(pu)柱，通過檢測(ce)器(qi)得(de)到(dao)不同的峰信(xin)號(hao)，後通(tong)過分(fen)析(xi)比(bi)對這(zhe)些信(xin)號(hao)來判(pan)斷(duan)待(dai)測(ce)物(wu)所含(han)有(you)的物質。
 

　　HPLC高(gao)效液(ye)相色(se)譜(pu)檢測(ce)儀(yi)作為壹(yi)種(zhong)重要(yao)的分(fen)析(xi)方法，廣泛(fan)的應用於化(hua)學(xue)和(he)生化分(fen)析(xi)中。高(gao)效液(ye)相色(se)譜(pu)從原(yuan)理(li)上與經(jing)典(dian)的液相色(se)譜(pu)沒有(you)本(ben)質的差別，它的特(te)點是(shi)采用(yong)了高(gao)壓輸液(ye)泵(beng)、高(gao)靈敏(min)度檢測(ce)器(qi)和(he)高(gao)效微(wei)粒固定相，適(shi)於分(fen)析(xi)高(gao)沸點(dian)不易(yi)揮(hui)發(fa)、分(fen)子(zi)量大(da)、不(bu)同極性的有機化(hua)合(he)物(wu)。